Qiagen質粒純化試劑盒QIAGEN Plasmid Midi Kit

傳統的QIAGEN Plasmid Giga Kits應用重力流陰離子交換柱QIAGEN-tip 100 高效純化質粒DNA，也單獨提供QIAGEN-tips 100。

* 實際產量取決于質?？截悢怠⒉迦肫未笮?、宿主菌、培養基和培養體積。
† 培養體積取決于質?？截悢?、插入片段大小、宿主菌和培養基。

原理

QIAGEN *的陰離子交換柱于核酸純化，其的抽提性能可確保DNA純度相當于甚至高于兩次CsCl梯度離心的產物。預裝的QIAGEN柱子以重力流方式純化，不會流干，將質粒制備所需的手工操作時間降至zui少。整個質粒純化系統避免了苯酚、氯仿、ethidium bromide和CsCl等有毒物質，將對用戶和環境的危害降至zui低。

操作步驟

應用QIAGEN Plasmid Kits純化過程中，通過離心取出細菌裂解液。然后將澄清的裂解液裝入陰離子交換柱，在適當的低鹽濃度和pH值條件下，陰離子交換柱會選擇性地結合質粒DNA。RNA、蛋白質、代謝物和其他小分子雜質通過中鹽濃度洗滌去除，應用高鹽濃度緩沖夜洗脫超純的質粒DNA（見流程圖"Comparison of QIAGEN Plasmid Kit Procedures"）。通過異丙醇沉淀濃縮并脫鹽DNA，離心法收集DNA。

應用

QIAGEN Plasmid Kits 純化所得的質粒DNA非常適合于諸如轉染、克隆、手動或自動測序（包括毛細管測序）和體外轉錄等應用。